樣本儲存方式不對，檢測功夫白費。
準備工作，如果收集處理好樣本，是檢測是否準確的關鍵步驟，和大家分享一下有關ELISA檢測樣本的收集處理方法。
可用於ELISA實驗的樣本一般有血清、血漿、尿液、裂解液、唾液、糞便、腦脊液、細胞培養上清以及組織勻漿等。不同樣本型別的預處理方法也不同。適當的樣本預處理是確保ELISA實驗正確性和準確性的第一步。這裡，我們將介紹幾種不同樣本型別的處理方法。
1.血清
血清是ELISA實驗常用的樣本，其預處理也十分簡單。
使用無熱原無內毒素的試管或離心管採集血液樣本，將試管或離心管在室溫下放置2小時或4℃過夜，分離出血清（建議傾斜試管或離心管以擴大液麵的橫截面，使血清可以更大程度地分離出來）。4℃下以1000×g離心20分鐘，小心收集上清液（血清），立即進行測定。建議在-20℃或-80℃下將收集的血清分裝儲存，
避免反覆凍融。
在收集血液樣本的過程中應
避免溶血，
因為紅細胞在溶解時會釋放具有過氧化物酶活性的物質，這種情況下，ELISA實驗中將會出現非特異性顯色反應，導致檢測結果不準確，出現假陽性結果。另外，樣本還應
避免細菌汙染
，因為細菌可能含有內源性HRP，也會導致檢測結果不準確。
2.血漿
使用含抗凝劑的採血管或離心管採集血液樣本，採集後30分鐘內，4℃下以1000×g離心15分鐘，小心收集上清液（血漿）。建議在-20℃或-80℃下將收集的血漿分裝儲存，避免反覆凍融。樣本應避免溶血或高血脂。常見的抗凝劑包括EDTA，肝素鈉，枸櫞酸鈉等。檢測前請仔細閱讀ELISA試劑盒說明書，檢視該試劑盒針對抗凝劑是否有特殊要求。
3.細胞培養上清
將細胞培養上清液吸入離心管中並以1000×g離心20分鐘，除去細胞碎片和雜質，收集上清液備用，樣本儲存在-20℃或-80℃，避免反覆凍融。
4.細胞
反覆凍融方法：
（1）吸出培養板中的培養基，用胰蛋白酶消化細胞，然後加入適量的培養基將培養板上的細胞沖洗乾淨。懸浮細胞可以省略該步驟。
（2）將細胞懸浮液收集到離心管中，以1000×g離心10分鐘，然後吸去培養基，用預冷PBS洗滌細胞3次。
（3）加入適量的預冷PBS（建議在使用前立即加入蛋白酶抑制劑）重懸細胞。在6孔培養板中，每個孔需要150-250μL的PBS來重懸細胞。
（4）使樣本在-20℃或-80℃條件和室溫條件下反覆凍融，重複凍融過程數次，直至細胞完全裂解。也可以使用超聲波細胞破碎器超聲處理懸浮液來裂解細胞。
（5）4℃下以10，000×g離心10分鐘，去除細胞碎片，收集上清液， -20℃或-80℃儲存，避免反覆凍融。
5.組織勻漿
（1）用預冷的PBS（0。01M，PH7。4）沖洗組織以除去表面殘留的血液或雜質。
（2）將組織塊稱重，然後切成儘可能小的碎塊，以便充分勻漿。
（3）加入適量的預冷PBS（體積取決於組織的重量，9 mL PBS適用於1 g組織，建議使用前立即在PBS中加入適量蛋白酶抑制劑），用玻璃勻漿器在冰上或冰浴中充分勻漿。
（4）將勻漿液吸入離心管中，4℃ 下以5000×g離心5~10分鐘，收集上清液，儲存至-20℃或-80℃，避免反覆凍融。
6.尿液、唾液及其他生物體液
以1000×g離心20分鐘，收集上清液，立即進行測定。
一般來說，由於ELISA實驗只能檢測可溶性蛋白質的含量，因此要求樣本應清晰透明並離心除去沉澱物或懸浮物質。為確保實驗的準確性， -20℃或-80℃儲存的樣本應在1-6個月內完成檢測，4℃儲存的樣本在一週內完成檢測。此外，樣本中不能含有會抑制HRP活性的NaN3，否則會造成假陰性結果。
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