pcr跑膠到哪裡比較合適？

使用者38660626398962021-07-16 12:48:42

pcr跑膠流程

（1） 配膠：取一定量的瓊脂糖於500 mL容量的三角瓶中，並加入TAE緩衝液，於微波爐中進行加熱，使得瓊脂糖全部溶解。

（2） 加入核酸染料，搖晃均勻。溶解液倒入插入梳子的膠盒，等待直到膠凝固。

（3） 膠輕輕放入電泳槽，並使TAE將膠完全浸沒。

（4） 點樣：取PCR溶液，加入Buffer，混勻後點入膠孔。同時在膠孔點入一個marker做驗證。

（5） 開啟電泳槽開關，30min後關閉電泳槽。

（6） 把膠拿到紫外下進行照射。驗證條帶大小。

使用者36496329748682021-07-28 22:05:19

這個需要根據目的片段的大小確定。

如果用的是1%的瓊脂糖凝膠目的片段又很大，例如1kb以上，可以將DNA loading跑到膠的末尾，如果只有100-200bp的長度，DNA loading跑帶膠的2/3處就行了。如果小於100bp，可以使用2%的瓊脂糖凝膠，膠跑到2/3處就行。具體還要根據片段大小確定。