在2009年，Bustin發表了一篇名為“The MIQE Guidelines： Minimum Information for Publication of Quantitative Real-Time PCR Experiments”的文章，其為MIBBI （Minimum Information for Biological and Biomedical Investigations） 專案的一部分，旨在為作者、審稿人和編輯說明需要在報道qPCR實驗時所需提供的最低資訊標準，以保證實驗的正確性、準確性和可重複性。
根據這篇文章的內容，該專案組提供了一個檢查清單，以幫助作者寫作使用qPCR實驗的文章。
在清單中，標註為E的條目為必要資訊，在文章寫作過程中必須提供，標註為D的條目為可選資訊，在文章提交時，可以提供也可以不提供。
清單的具體內容如下：
實驗設計
必要資訊：
1。 實驗組和對照組的定義
2。 每一組中的樣品數目
可選資訊：
1。 實驗是由作者所在的實驗室完成還是委託其它實驗室完成？
2。 對作者貢獻的感謝
樣品資訊
必要資訊：
1。 樣品如何採集
2。 樣品如何以及在多長時間內被冷凍
3。 樣品如何以及在多長時間內固定化
4。 樣品的儲存條件和儲存時間
可選資訊：
1。 樣品的體積或重量
核酸提取
必要資訊：
1。 核酸提取所用試劑盒及一切操作改動
2。 DNase或RNase處理詳細過程
3。 DNA或RNA汙染評估過程
4。 核酸定量所用的儀器和方法
5。 RNA完整性檢測方法
6。 提取RNA的RIN或RQI值
7。 PCR抑制測試
可選資訊：
1。 核酸提取中所用額外試劑的來源
2。 提取核酸的純度和濃度
3。 瓊脂糖凝膠電泳檢測結果
反轉錄
必要資訊：
1。 完整的反轉錄反應條件
2。 RNA用量和反應體系體積
3。 所用引物和濃度
4。 所用反轉錄酶及其濃度
5。 反應的溫度和時間
可選條件：
1。 試劑的生產廠商和貨號
2。 cDNA儲存條件
3。 反轉錄前後樣品Ct值比較
qPCR靶標資訊
必要資訊：
1。 是否為多重檢測
2。 每一個靶標基因的擴增效率和檢測限
3。 靶標基因的序列識別號
4。 擴增子的長度
5。 擴增子的生物資訊學特異性掃描 （BLAST）
6。 引物在外顯子或內含子上的位置
7。 測定靶標含有哪些可變剪下
可選擇資訊：
1。 qPCR擴增的位置
2。 擴增位置是否含有假基因、反轉錄假基因或其它同源
3。 擴增子與靶基因的序列比對結果
4。 擴增子的二級結構分析結果
qPCR引物
必要資訊：
1。 引物序列
2。 在參考引物序列上所做的一切修改
可選擇資訊：
1。 引物在RTPrimerDB上的識別號
2。 探針序列
3。 引物的生產商
4。 引物的純化方法
qPCR實驗方案
必要資訊：
1。 完整的反應條件
2。 反應體系的體積以及模板的新增量
3。 引物、探針、Mg離子和dNTP的濃度
4。 所用的聚合酶及其濃度
5。 所使用的緩衝液或試劑盒的名稱和生產廠商
6。 反應體系中的其它新增試劑
7。 完整的溫度迴圈引數
8。 qPCR儀器的生產商
可選擇資訊：
1。 反應buffer中的化學成分
2。 承裝反應體系的管的貨號和生產商
3。 實驗設定方法 （手動/自動）
qPCR的驗證
必要資訊：
1。 qPCR實驗的特異性 （凝膠電泳、序列比對、熔解曲線等）
2。 陰性對照的Ct值
3。 標準曲線的斜率和y軸截距
4。 標準曲線的擴增效率
5。 標準曲線的r2值
6。 標準曲線的定量範圍
7。 在檢測限附近Ct值的變化
8。 qPCR的檢測限
可選擇資訊：
1。 qPCR反應最適化的證據
2。 標準曲線擴增效率和標準差的置信區間
3。 檢測範圍的置信區間
資料分析
必要資訊：
1。 qPCR的分析程式來源和版本
2。 Ct值的確定方法
3。 離群結果的鑑定和處理
4。 陰性對照的結果
5。 內參基因的數目和選擇
6。 標準化方法的描述
7。 每一步技術重複的數目
8。 實驗的可重複性
9。 結果分析的統計學方法
10。 資料分析所用軟體的來源和版本
可選擇資訊：
1。 生物學重複的數目
2。 實驗的再現性
3。 能效分析
4。 Ct值或原始資料上傳RDML
原文連結：
https：//www。
jianshu。com/p/410bb9e9e
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