解決蛋白質定量的問題(是什麼蛋白髮生了多少變化)

應用場景:

1。需要精確定量不同樣品間蛋白表達差異

2。需要檢測的樣品蛋白含量高

3。需要在較高影響因子國際學術期刊上發表文章

技術優勢:

通量高:可一次實現最多8-10次樣品的分離分析

適用範圍廣,可標記各種動作、植物、微生物、細胞、體液等樣品

重複性好且定量準確:所有樣品的分離鑑定條件完全一致,保證了實驗重複性,同時增強定量的準確性

解析度高:可與最高解析度的LC-MSMS技術結合,實現對低丰度蛋白的定量定性

資料豐富:可以同時獲得檢測到的蛋白的定性和定量資訊

自動化程度高:以高解析度液質聯用為基礎,自動化操作,分析速快

應用領域

iTRAQ(穩定同位素標記蛋白質組學技術)

iTRAQ(穩定同位素標記蛋白質組學技術)

iTRAQ標記定量原理

1。 iTRAQ(isobaric tags for relative and absolute quantitation),同位素標記相對與絕對定量技術)技術是由ABI公司開發,其標籤試劑可與氨基(包括氨基酸N端及賴氨酸側鏈氨基)反應實現連線,標記通量分為4標和8標。

2。 在一級質譜中,不同來原的相同肽段被連線上總質量相同的完整iTRAQ標籤試劑,具有相同質荷比,表現為一個峰。

3。 在二級質譜中,iTRAQ標籤試劑在不同基團連線處發生斷裂,試劑中報告基團表現訊號(平衡基團發生中性丟失),根據不同報告基團訊號峰強弱進行肽段定量並根據肽段二級質譜資訊實現肽段定性,並最終回溯到蛋白水平。

iTRAQ基本原理

iTRAQ(穩定同位素標記蛋白質組學技術)

iTRAQ(穩定同位素標記蛋白質組學技術)

iTRAQ工作流程

iTRAQ(穩定同位素標記蛋白質組學技術)

iTRAQ(穩定同位素標記蛋白質組學技術)